Mikroskopická facilita zajišťuje provoz tří fluorescenčních konfokálních mikroskopů a uživatelskou podporu při práci s nimi. Kromě stadardního snímání fluorescenčních obrázků, nabízíme i časosběrná snímání, snímání velkých ploch nebo snímání ve třech rozměrech. Vše je možné provádět na živých buňkách ve zcela inkubovaném režimu. Dále jsou k dispozici i pokročilé fluorescenční techniky jako je zobrazování doby života fluorescence (FLIM), korelační spektroskopie (FCCS), měřění anizotropie nebo použití superrozlišovací mikroskopie s detektorem Airyscan. Vedle konfokálního módu máme k dispozici i kamery pro práci ve widefield módu.


Naše mikroskopy

  1. ZEISS LSM 780 (místnost C.3.08)

    Konfokální mikroskop je vybaven pulzním laserem Intune s laditelnou vlnovou délkou (488 – 640 nm), 405 nm laserem fungujícím v pulzním i kontinuálním módu, dále standardními lasery: Argonovým (458, 488, 514 nm), pevnolátkovým (561 nm) a HeNe laserem (633 nm). Mikroskop má tři vnitřní detektory, z nichž jeden je spektrálně rozlišený.

    Další možnosti:

    • FLIM s externími detektory (Picoquant)
    • Korelační spektroskopie
    • Měření anizotropie
    • Zobrazování widefield (možný TIRF).




  2. ZEISS LSM 980 (místnost A.01.85)

    Konfokální mikroskop je určen především pro “bioimaging.” Je plně inkubován (teplota, CO2). Mikroskop je vybaven běžnými laserovými liniemi (405, 445, 488, 561, 639 nm), spektrální detekcí a detektorem Airyscan. Airyscan představuje speciální array detektor, který analyzuje emisní svazek světla. Tato analýza zlepšuje rozlišení (faktorem až 1.4), zlepšuje poměr signálu k šumu a/nebo zvětšuje rychlost akvizice, obzvláště v kombinaci s rychlým, chlazeným galvanickým skenerem.

  3. LEICA SP8 + FALCON upgrade (místnost A.01.85)

    Konfokální mikroskop je primárně určen pro složitější biofyzikální experimenty. Je proto vedle základních kontinuálních laserů vybaven škálou vzájemně synchronizovatelných pulzních laserů (405, 440, 470, 640 nm a tzv. bílým laserem, který pokrývá vlnové délky 470-670 nm) a systémem Falcon, který slouží pro snímání map časového dohasínání fluorescence (FLIM). Falcon používá metodu “fast FLIM,” která má nižší časové rozlišení (97 ps), což umožňuje používat velké toky fotonů (asi 20-ti násobně vyšší oproti běžnému FLIMu) a vytvářet tak i třídimenzionální FLIM obrázky nebo FLIM videa. Vedle FLIMu systém Falcon umožňuje provádět měření fluorescenční kroskorelační spektoskopie (FCCS), pro nějž lze na nanosekundové škále alternativně pulzovat libovolnými dvěma laserovými liniemi a vyhnout se tak nežádoucím artefaktům měření.




Lidé


Rezervační systém

Měřící čas na všech mikroskopech lze zarezervovat v on-line rezervačním systemu ÚOCHB

Pokyny

Pokyny pro přístup k software pro analýzu obrazu a jeho používání.