Vědecko-servisní skupina Elektromigrační metody poskytuje následující služby:
Analýza
Kvalitativní a kvantitativní analýza širokého spektra ionogenních i elektroneutrálních polárních látek: kyseliny, báze, ionty kovů, aminy, aminokyseliny, peptidy, proteiny, nukleobáze, nukleosidy, nukleotidy, fragmenty nukleových kyselin, sacharidy, steroidy, aj.
Používané kapilární elektromigrační (CE) metody: zónová elektroforéza (CZE) ve volném roztoku (FSCE) nebo v sítovacím/gelovém prostředí (CSE/CGE), izotachoforéza (CITP), izoelektrická fokusace (CIEF), afinitní elektroforéza (ACE), elektrokinetická chromatografie (CEKC) a elektrochromatografie (CEC).
Těmito metodami lze určovat stupeň čistoty (elektroforetické nebo elektrochromatografické homogenity) syntetizovaných či izolovaných výše uvedených látek a stanovovat obsah solí ve vzorcích těchto látek. Prostřednictvím CE analýz je možné sledovat syntézu, izolaci a purifikaci výše uvedených látek a průběh jejich chemických reakcí, nekovalentních interakcí a enzymatických přeměn. Provádět lze rovněž stanovení vybraných analytů v komplexních (bio)matricích (biologických tekutinách a tkáňových extraktech).
Separace a mikropreparace
Separace komplexních směsí ionogenních i neionogenních látek, např. profilování peptidů a proteinů v biomatricích, peptidové mapování bílkovin, restrikční mapování nukleových kyselin, aj. Separace izomerů (pozičních, geometrických, optických – enantiomerů a diastereomerů) výše uvedených látek v analytickém nebo mikropreparativním měřítku. Izolace výše uvedených látek v mikroměřítku (100 ng – 2 µg).
Fyzikálně-chemická charakterizace
Určování následujících fyzikálně-chemických veličin ionogenních látek: efektivní elektroforetická pohyblivost, aktuální a limitní iontové pohyblivosti, efektivní náboj, izoelektrický bod, hydrodynamický poloměr, relativní molekulová hmotnost, difuzní koeficient, konstanta acidity (pKa), vazebná (asociační/disociační) konstanta (konstanta stability) komplexů (Kb, KD, Kst). Z určené vazebné/disociační konstanty komplexu a její závislosti na teplotě lze určit změny Gibbsovy energie, entalpie a entropie při tvorbě komplexu.
Přístroje
- CE analyzátor 7100 Agilent, 2×
- CE analyzátor P/ACE Beckman Coulter, 2×
- CE modul pro připojení ke hmotnostnímu spektrometru
Formuláře
Kontakty
- Vedoucí skupiny: Václav KAŠIČKA (A.2.91, ☎ 239, vaclav.kasicka@uochb.cas.cz)
- Zástupce vedoucího skupiny: Dušan KOVAL (A.2.89, ☎ 546, dusan.koval@uochb.cas.cz)