Skupina necílené metabolomiky nabízí vědeckým skupinám ÚOCHB nejnovější technologie LC-MS analýzy a podporu při zpracování a interpretaci metabolomických dat. Cílem necílené metabolomické analýzy je komplexní profilování malých molekul přítomných v biologických vzorcích, např. v buněčných kulturách, krevních vzorcích nebo rostlinných tkáních.
Jak začít s Vaší metabolomickou analýzou
Abychom plně porozuměli Vašim výzkumným cílům a záměrům, začíná každý projekt individuální konzultací. Poté můžeme probrat postup přípravy vzorku a naplánovat LC-MS analýzy.
Poskytované služby
Příprava vzorků
Od uživatelů se očekává, že si vzorky pro analýzu připraví sami. K tomu nabízíme následující formy podpory:
- Standardizované protokoly přípravy vzorků pro různé biologické matrice. Můžeme poskytnout rozpouštědla a spotřební materiál (např. vialky nebo destičky) kompatibilní s naším LC-MS systémem.
- Podporu při vývoji vlastních protokolů přípravy vzorků
- Školení přípravy vzorků
- Přístup k zařízení pro homogenizaci vzorků (např. TissueLyser) a potřebné školení
LC-MS analýza
Skupina je vybavena hmotnostním spektrometrem s vysokým rozlišením (Orbitrap ID-X, Thermo Fisher Scientific) spojeným s biokompatibilním systémem
ultra-vysokoúčinné kapalinové chromatografie (Vanquish, Thermo Fisher Scientific). Kromě toho lze využít detektor DAD (UV a VIS). K dispozici jsou
standardní LC separační kolony (s reverzní fází a HILIC). Konfiguraci systému LC-MS lze upravit na základě požadavků každého projektu.
Analýza dat
Aby bylo možné získat relevantní informace, hrubá data z necílené LC-MS analýzy vyžadují další zpracování. V souladu s tím poskytujeme tyto služby:
- Posouzení kvality hrubých dat (např. přesnost/reprodukovatelnost, odstranění artefaktů)
- Standardizované postupy analýzy dat pro:
- Detekci LC-MS „píků” (signály definované jejich m/z a retenčním časem) a jejich proložení napříč vzorky/nástřiky
- Anotace metabolitů pomocí spektrálních knihoven (komerčních, veřejných nebo vlastních) a/nebo in-silico predikce struktury
- Univariační a multivariační statistickou analýzu
- Identifikaci analogů a derivátů pomocí podobnosti MS/MS spekter v molekulárních sítích (tzv. “mass spectral molecular networking”)
- Podpora při interpretaci výsledků a jejich grafickém zpracování
- Příprava výstupů pro publikace
Kontakty
- Tomáš PLUSKAL (vedoucí skupiny), ☎ 400
- Zsófia KUTILOVÁ (LC-MS), ☎ 378
- Tito DAMIANI (analýza dat), ☎ 377
- Alžběta KADLECOVÁ (lab manager), ☎ 378