Cytotoxicitní screening
Všechny látky vložené do IOCB knihovny automaticky procházejí základním cytotoxicitním screeningem při 10 µM koncentraci. Pro aktivní látky (>50% pokles životnosti buněk) jsou stanoveny hodnoty IC50. Všechny naměřené hodnoty jsou v tabulární podobě vloženy do databáze (AHL), kde jsou k dispozici pracovníkům příslušných vědeckých skupin. (Pro instalaci databáze kontaktujte Pavla Šáchu.)
Koncentrační křivky, případně RAW data poskytujeme na vyžádání.
Buněčné linie v základním panelu (všechny jsou lidské):
- CCRF-CEM – T-lymfoblastická leukemie (suspenzní)
- HL-60 – promyelocytická leukemie (suspenzní)
- HepG2 – hepatocelulární karcinom (adherentní)
- HeLa S3 – HPV-pozitivní cervikální karcinom (adherentní)
- NHDF – normální kožní fibroblasty (adherentní)
Metodika
Standardně toxicitu vyšetřujeme po třídenní (72 h) inkubaci buněk látkami. Pro hodnocení cytotoxicity používáme metodu založenou na stanovení buněčného ATP, které koreluje s množstvím životaschopných buněk v kultuře. K tomu využíváme komerční činidlo CellTiter Glo®2.0 (Promega) s luminiscenční koncovkou. Testujeme v 384-jamkovém formátu.
Speciální požadavky
Chápeme, že ve specifických případech je nutné standardní podmínky testování upravit, změnit panel linií, testované koncentrace, čas, detekci … Nebo máte omezené množství látky, kterou nemůžete dát do knihovny, případně na testování velmi spěcháte (typicky v aktivních drug discovery projektech). V těchto případech se lze domluvit na individuálním formátu testování.
Kontakty
- Eva Tloušťová (rutinní screening, příjem vzorků, interpretace dat), ☎ 271/403
- Helena Mertlíková Kaiserová (speciální požadavky, implementace cytotoxicitních testů do screenovacích cyklů projektů lékového vývoje), ☎ 114